Home PI3K/Akt/mTOR mTOR Inhibitor WAY-600

Nur für die Forschung bestimmt

WAY-600 mTOR Inhibitor

Kat.-Nr.: S2689

WAY-600 ist ein potenter, ATP-kompetitiver und selektiver Inhibitor von mTOR mit einer IC50 von 9 nM; diese Verbindung blockiert mTORC1/P-S6K(T389) und mTORC2/P-AKT(S473), aber nicht P-AKT(T308); sie ist selektiver für mTOR als PI3Kα (>100-fach) und PI3Kγ (>500-fach).
WAY-600 mTOR Inhibitor Chemical Structure

Chemische Struktur

Molekulargewicht: 494.59

Springen zu

Qualitätskontrolle (Quality Control)

Charge: S268901 DMSO]22 mg/mL]false]Ethanol]2 mg/mL]false]Water]Insoluble]false Reinheit: 99.34%
  • In Nature Medicine für seine erstklassige Qualität zitiert
  • COA
  • NMR
  • HPLC
  • SDS
  • Datenblatt
99.34

Chemische Informationen, Lagerung & Stabilität (Chemical Information, Storage & Stability)

Molekulargewicht 494.59 Formel

C28H30N8O

 Lagerung (Ab Erhaltdatum)
CAS-Nr. 1062159-35-6 SDF herunterladen Lagerung von Stammlösungen

Synonyme N/A Smiles C1CN(CCC1N2C3=C(C=N2)C(=NC(=N3)C4=CC5=C(C=C4)NC=C5)N6CCOCC6)CC7=CN=CC=C7

Löslichkeit (Solubility)

In vitro
Charge:

DMSO : 22 mg/mL (44.48 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Ethanol : 2 mg/mL

Water : Insoluble

Molaritätsrechner

Masse Konzentration Volumen Molekulargewicht
Verdünnungsrechner Molekulargewicht-Rechner

In vivo
Charge:

In-vivo-Formulierungsrechner (Klare Lösung)

Schritt 1: Geben Sie unten die Informationen ein (Empfohlen: Ein zusätzliches Tier einplanen, um Verluste während des Experiments auszugleichen)

mg/kg g μL

Schritt 2: Geben Sie die In-vivo-Formulierung ein (Dies ist nur der Rechner, nicht die Formulierung. Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn im Abschnitt Löslichkeit keine In-vivo-Formulierung angegeben ist.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berechnungsergebnisse:

Arbeitskonzentration: mg/ml;

Methode zur Herstellung der DMSO-Stammflüssigkeit: mg Wirkstoff voraufgelöst in μL DMSO ( Konzentration der Stammflüssigkeit mg/mL, Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn die Konzentration die DMSO-Löslichkeit der jeweiligen Wirkstoffcharge überschreitet. )

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammflüssigkeit, fügen Sie als Nächstes hinzuμL PEG300, mischen und aufklären, fügen Sie als Nächstes hinzuμL Tween 80, mischen und aufklären, fügen Sie als Nächstes hinzu μL ddH2O, mischen und aufklären.

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammflüssigkeit, fügen Sie als Nächstes hinzu μL Maisöl, mischen und aufklären.

Hinweis: 1. Bitte stellen Sie sicher, dass die Flüssigkeit klar ist, bevor Sie das nächste Lösungsmittel hinzufügen.
2. Achten Sie darauf, die Lösungsmittel in der richtigen Reihenfolge hinzuzufügen. Sie müssen sicherstellen, dass die im vorherigen Schritt erhaltene Lösung klar ist, bevor Sie das nächste Lösungsmittel hinzufügen. Physikalische Methoden wie Vortexen, Ultraschall oder ein warmes Wasserbad können zur Unterstützung des Lösungsvorgangs verwendet werden.

Wirkungsmechanismus (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
mTOR
9 nM
In vitro
Immune-complex kinase assay shows mTORC2-specific substrate His6-AKT or the mTORC1 substrate His6-S6K is dose dependently inhibited by WAY-600. This compound globally inhibits mTOR signaling and AKT function in cellular models dose dependently. It profoundly inhibits cap-dependent and global protein synthesis in MDA361, human breast cancer cells. This chemical shows antiproliferative effects in various cancer cell lines involving G1 cell cycle arrest and selective apoptosis. It down-regulate angiogenic factors, VEGF and HIF-1α, in U87MG, MDA361 and LNCap cells.
Kinase-Assay
DELFIA-Format von gereinigtem FLAG-TOR
Die Routinetests mit gereinigtem FLAG-TOR (FL und 3.5) werden in 96-Well-Platten wie folgt durchgeführt. Enzyme werden zuerst in Kinase-Assay-Puffer (10 mM Hepes (pH 7.4), 50 mM NaCl, 50 mM β-Glycerophosphat, 10 mM MnCl2, 0.5 mM DTT, 0.25 lM Microcystin LR und 100 lg/mL BSA) verdünnt. Zu jeder Vertiefung werden 12 μL des verdünnten Enzyms kurz mit 0.5 μL Testinhibitor oder Kontroll-Vehikel Dimethylsulfoxid (DMSO) gemischt. Die Kinase-Reaktion wird durch Zugabe von 12.5 μL Kinase-Assay-Puffer, der ATP und His6-S6K enthält, initiiert, um ein Endreaktionsvolumen von 25 μL zu ergeben, das 800 ng/mL FLAG-TOR, 100 μM ATP und 1.25 μM His6-S6K enthält. Die Reaktionsplatte wird 2 Stunden (linear bei 1–6 Stunden) bei Raumtemperatur unter leichtem Schütteln inkubiert und dann durch Zugabe von 25 μL Stopppuffer (20 mM Hepes (pH 7.4), 20 mM EDTA und 20 mM EGTA) beendet. Die DELFIA-Detektion des phosphorylierten (Thr-389) His6-S6K wird bei Raumtemperatur unter Verwendung eines monoklonalen Anti-P(T389)-p70S6K-Antikörpers (1A5) durchgeführt, der mit Europium-N1-ITC (Eu) (10.4 Eu pro Antikörper) markiert ist. Fünfundvierzig Mikroliter des beendeten Kinase-Reaktionsgemisches werden auf eine MaxiSorp-Platte überführt, die 55 μL PBS enthält. Das His6-S6K darf 2 Stunden lang binden, wonach die Vertiefungen abgesaugt und einmal mit PBS gewaschen werden. Einhundert Mikroliter DELFIA-Puffer mit 40 ng/mL Eu-P(T389)-S6K-Antikörper werden hinzugefügt. Die Antikörperbindung wird 1 Stunde lang unter leichtem Rühren fortgesetzt. Die Vertiefungen werden dann abgesaugt und viermal mit PBS, das 0.05 % Tween 20 (PBST) enthält, gewaschen. Einhundert Mikroliter DELFIA-Enhancement-Lösung werden zu jeder Vertiefung hinzugefügt und die Platten werden in einem PerkinElmer Victor Modell Plattenlesegerät abgelesen. Die erhaltenen Daten werden verwendet, um die enzymatische Aktivität und die Enzyminhibition durch potenzielle Inhibitoren zu berechnen.
Referenzen