Home PI3K/Akt/mTOR PDPK1 Inhibitor OSU-03012 (AR-12)

Nur für die Forschung bestimmt

OSU-03012 (AR-12) PDPK1 Inhibitor

Kat.-Nr.: S1106

OSU-03012 (AR-12) ist ein potenter Inhibitor der rekombinanten PDK-1 (Phosphoinositid-abhängige Kinase 1) mit einer IC50 von 5 μM in einem zellfreien Assay, der eine 2-fache Potenzsteigerung gegenüber OSU-02067 aufweist.
OSU-03012 (AR-12) PDPK1 Inhibitor Chemical Structure

Chemische Struktur

Molekulargewicht: 460.45

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Qualitätskontrolle (Quality Control)

Charge: Reinheit: 99.22%
99.22

Zellkultur, Behandlung & Arbeitskonzentration
(Cell Culture, Treatment & Working Concentration)

Zelllinien Assay-Typ Konzentration Inkubationszeit Formulierung Aktivitätsbeschreibung PMID
mouse RAW264.7 cells Function assay 8 h Antimicrobial activity against Salmonella enterica serovar Typhimurium ATCC 14028 infected in mouse RAW264.7 cells assessed as inhibition of intracellular bacterial growth after 8 hrs, IC50=0.2 μM
mouse RAW264.7 cells Cytotoxic assay 24 h Cytotoxicity against mouse RAW264.7 cells assessed as cell viability after 24 hrs by MTT assay, IC50=10 μM
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Chemische Informationen, Lagerung & Stabilität (Chemical Information, Storage & Stability)

Molekulargewicht 460.45 Formel

C26H19F3N4O

 Lagerung (Ab Erhaltdatum)
CAS-Nr. 742112-33-0 SDF herunterladen Lagerung von Stammlösungen

Synonyme N/A Smiles C1=CC=C2C(=C1)C=CC3=C2C=CC(=C3)C4=CC(=NN4C5=CC=C(C=C5)NC(=O)CN)C(F)(F)F

Löslichkeit (Solubility)

In vitro
Charge:

DMSO : 92 mg/mL (199.8 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Ethanol : 6 mg/mL

Water : Insoluble

Molaritätsrechner

Masse Konzentration Volumen Molekulargewicht
Verdünnungsrechner Molekulargewicht-Rechner

In vivo
Charge:

In-vivo-Formulierungsrechner (Klare Lösung)

Schritt 1: Geben Sie unten die Informationen ein (Empfohlen: Ein zusätzliches Tier einplanen, um Verluste während des Experiments auszugleichen)

mg/kg g μL

Schritt 2: Geben Sie die In-vivo-Formulierung ein (Dies ist nur der Rechner, nicht die Formulierung. Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn im Abschnitt Löslichkeit keine In-vivo-Formulierung angegeben ist.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berechnungsergebnisse:

Arbeitskonzentration: mg/ml;

Methode zur Herstellung der DMSO-Stammflüssigkeit: mg Wirkstoff voraufgelöst in μL DMSO ( Konzentration der Stammflüssigkeit mg/mL, Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn die Konzentration die DMSO-Löslichkeit der jeweiligen Wirkstoffcharge überschreitet. )

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammflüssigkeit, fügen Sie als Nächstes hinzuμL PEG300, mischen und aufklären, fügen Sie als Nächstes hinzuμL Tween 80, mischen und aufklären, fügen Sie als Nächstes hinzu μL ddH2O, mischen und aufklären.

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammflüssigkeit, fügen Sie als Nächstes hinzu μL Maisöl, mischen und aufklären.

Hinweis: 1. Bitte stellen Sie sicher, dass die Flüssigkeit klar ist, bevor Sie das nächste Lösungsmittel hinzufügen.
2. Achten Sie darauf, die Lösungsmittel in der richtigen Reihenfolge hinzuzufügen. Sie müssen sicherstellen, dass die im vorherigen Schritt erhaltene Lösung klar ist, bevor Sie das nächste Lösungsmittel hinzufügen. Physikalische Methoden wie Vortexen, Ultraschall oder ein warmes Wasserbad können zur Unterstützung des Lösungsvorgangs verwendet werden.

Wirkungsmechanismus (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
PDPK1
(Cell-free assay)
5 μM
In vitro

OSU-03012 (AR-12) induces apoptotic death in PC-3 cells with IC50 of 5 µM and reduces the activity of immunoprecipitated p70S6K. It completely suppresses cell growth in a diverse range of tumor cell lines at concentrations of 3–5 μm, as compared with the concentration of at least 50 μm. This compound promotes cell killing to a greater extent in glioma cells than in nontransformed astrocytes. It causes a dose-dependent induction of cell death that is not altered by p53 mutation, expression of ERBB1 VIII, or loss of phosphatase and tensin function due to a homolog deletion on chromosome 10. OSU-03012 and ionizing radiation cause an additive, caspase-independent elevation in cell killing. Its lethality as a single agent or when combined with signaling modulators is not modified in cells lacking expression of BIM or of BAX/BAK. It promotes the release of cathepsin B from the lysosomal compartment and that of AIF from mitochondria. The lethality of this compound is attenuated in protein kinase R-like endoplasmic reticulum kinase-/- cells, which correlated with the reduced cleavage of BID and suppression of cathepsin B and AIF release into the cytosol. It inhibits thyroid cancer cell (NPA, WRO, and ARO cells) proliferation, migration and induces apoptosis, which results in an increase of cells in the S phase without an increase of cells in G2. OSU-03012 is an ATP-competitive inhibitor of PAK activity and suppresses the phosphorylation of AKT in thyroid cancer cells. It inhibits cell growth of hepatocellular carcinoma cell lines including Huh7, Hep3B and HepG2 cells with IC50 values below 1 μM. This compound does not suppress PDK1 or AKT activity or induce cellular apoptosis but induces autophagy in Huh7 cells. Moreover, accumulation of reactive oxygen species (ROS) is detected after its treatment. A recent study shows that it could enhance the susceptibility of (Bcr)-Abl mutant cell lines to -induced apoptosis.

Kinase-Assay
PDK-1 Kinase-Assay
Dieser In-vitro-Assay wird unter Verwendung eines PDK-1-Kinase-Assay-Kits durchgeführt. Dieser zellfreie Assay basiert auf der Fähigkeit der rekombinanten PDK-1, in Gegenwart von DMSO-Vehikel oder OSU-03012 (AR-12), ihre nachgeschaltete Serum- und Glukokortikoid-regulierte Kinase zu aktivieren, die wiederum das Akt/Serum- und Glukokortikoid-regulierte Kinase-spezifische Peptidsubstrat RPRAATF mit [γ-32P]ATP phosphoryliert. Das 32P-phosphorylierte Peptidsubstrat wird dann mittels P81-Phosphocellulosepapier von dem restlichen [γ-32P]-ATP getrennt und nach drei Waschvorgängen mit 0,75%iger Phosphorsäure in einem Szintillationszähler quantifiziert.
In vivo

OSU-03012 (AR-12) suppresses tumor growth by 57.59% and increases cleaved LC3 in Huh7 tumor xenografts at 200 mg/kg. This compound remarkably decreases expression of EGFR protein in the tumors by 48% compared with vehicle controls and also prevents YB-1 from binding to the EGFR promoter in MDA-MB-435/LCC6 xenografts. It is well tolerated and inhibits the growth of HMS-97 schwannoma xenografts by 55% after oral administration.

Referenzen
  • [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19010909/
  • [5] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/15665113/
  • [6] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17595327/
  • [7] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/19359162/

Anwendungen (Applications)

Methoden Biomarker Bilder PMID
Western blot p-Akt / Akt
S1106-WB1
18413750
Growth inhibition assay Cell viability
S1106-viability1
18413750

Informationen zu klinischen Studien (Clinical Trial Information)

(Daten von https://clinicaltrials.gov, aktualisiert am 2014-01-29)

NCT-Nummer Rekrutierung Bedingungen Sponsor/Kollaboratoren Startdatum Phases
NCT00978523 COMPLETED
Solid Tumors; Lymphoma
Arno Therapeutics
 2009-08 PHASE1