Home TGF-beta/Smad PKC Inhibitor Chelerythrine Chloride (NSC 646662)

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Chelerythrine Chloride (NSC 646662) PKC Inhibitor

Kat.-Nr.: S1292

Chelerythrine Chloride (NSC 646662, Broussonpapyrine) ist ein potenter, selektiver Antagonist von PKC mit einer IC50 von 0,66 μM.
Chelerythrine Chloride (NSC 646662) PKC Inhibitor Chemical Structure

Chemische Struktur

Molekulargewicht: 384.83

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Qualitätskontrolle (Quality Control)

Charge: Reinheit: 99.53%
99.53

Chemische Informationen, Lagerung & Stabilität (Chemical Information, Storage & Stability)

Molekulargewicht 384.83 Formel

C21H18NO4.HCl

 Lagerung (Ab Erhaltdatum)
CAS-Nr. 3895-92-9 SDF herunterladen Lagerung von Stammlösungen

Synonyme Broussonpapyrine chloride Smiles C[N+]1=C2C(=C3C=CC(=C(C3=C1)OC)OC)C=CC4=CC5=C(C=C42)OCO5.[Cl-]

Löslichkeit (Solubility)

In vitro
Charge:

DMSO : 3 mg/mL (7.79 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Water : Insoluble

Ethanol : Insoluble

Molaritätsrechner

Masse Konzentration Volumen Molekulargewicht
Verdünnungsrechner Molekulargewicht-Rechner

In vivo
Charge:

In-vivo-Formulierungsrechner (Klare Lösung)

Schritt 1: Geben Sie unten die Informationen ein (Empfohlen: Ein zusätzliches Tier einplanen, um Verluste während des Experiments auszugleichen)

mg/kg g μL

Schritt 2: Geben Sie die In-vivo-Formulierung ein (Dies ist nur der Rechner, nicht die Formulierung. Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn im Abschnitt Löslichkeit keine In-vivo-Formulierung angegeben ist.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berechnungsergebnisse:

Arbeitskonzentration: mg/ml;

Methode zur Herstellung der DMSO-Stammflüssigkeit: mg Wirkstoff voraufgelöst in μL DMSO ( Konzentration der Stammflüssigkeit mg/mL, Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn die Konzentration die DMSO-Löslichkeit der jeweiligen Wirkstoffcharge überschreitet. )

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammflüssigkeit, fügen Sie als Nächstes hinzuμL PEG300, mischen und aufklären, fügen Sie als Nächstes hinzuμL Tween 80, mischen und aufklären, fügen Sie als Nächstes hinzu μL ddH2O, mischen und aufklären.

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammflüssigkeit, fügen Sie als Nächstes hinzu μL Maisöl, mischen und aufklären.

Hinweis: 1. Bitte stellen Sie sicher, dass die Flüssigkeit klar ist, bevor Sie das nächste Lösungsmittel hinzufügen.
2. Achten Sie darauf, die Lösungsmittel in der richtigen Reihenfolge hinzuzufügen. Sie müssen sicherstellen, dass die im vorherigen Schritt erhaltene Lösung klar ist, bevor Sie das nächste Lösungsmittel hinzufügen. Physikalische Methoden wie Vortexen, Ultraschall oder ein warmes Wasserbad können zur Unterstützung des Lösungsvorgangs verwendet werden.

Wirkungsmechanismus (Mechanism of Action)

Eigenschaften
Chelerythrine is at least 100-fold more selective for PKCs than for other kinases.
Targets/IC50/Ki
PKC
(Cell-free assay)
0.66 μM
In vitro

Chelerythrine Chloride (NSC 646662) interacts with the catalytic domain of PKC, is a competitive inhibitor with respect to the phosphate acceptor (histone IIIS) with Ki value of 0.7 μM and a non-competitive inhibitor with respect to ATP. It shows potent cytotoxic effects against L-1210 cells with IC50 of 0.53 μM. This compound does not alter any activity of PKA, TPK and Ca/CM-PK, and its inhibitory effect on PKC activity does not vary among the various substrates including GS, MLC, MBP and Fibrinogen. It inhibits PKC activity in crude cell extracts from SQ-20B cells in a dose dependent manner. Chelerythrine decreases cell viability as determined by the MTT assay in a dose-dependent manner in SCC35, JSQ3, SQ20B and SCC61 cells. At 5 μM, it suppresses VEGF-induced expression of ICAM-1, VCAM-1, and E-selectin in HUVECs. It also suppresses VEGF-induced NF-κB activity in HUVECs at the same concentration and all suppresses basal and VEGF-induced leukocyte adhesiveness in HUVECs. At concentrations of 6 mM-30 mM, it rapidly induces pyknosis, shrinkage and subsequent cell death in cardiac myocytes. Chelerythrine(30 μM)-induced myocyte death is accompanied by nuclear fragmentation and activation of caspase-3 and -9 in primary culture of neonatal rat ventricular myocytes. At 10 μM, it causes cytochrome c release from mitochondria, suggesting that ROS mediates chelerythrine-induced cytochrome c release in cardiac myocytes. It displaces the fluorescently labeled BH3 domain peptide from a recombinant GST-BcLXL fusion protein with IC50 of 1.5 μM. At 2.5 μM and 5 μM for 16 hours, it induces a substantial decrease in mitochondrial potential as indicated by an increase in JC-1 green fluorescence in human neuroblastoma SH-SY5Y cells. At 5 μM, it also induces the appearance of sub-G1 DNA that is indicative of apoptosis in SH-SY5Y cells. At 10 μM, it induces mitochondrial potential change, CytC release from the mitochondria in SH-SY5Y cells.

Kinase-Assay
Assay für Proteinkinase C
Die gereinigte Proteinkinase C wird aus Rattenhirn präpariert. Kurz gesagt, das Inkubationsgemisch (200 μL) enthält 20 mM Tris/HCl-Puffer (pH 7,5), 10 mM MgCl2, 200 μg/mL Histone, Mizellen, hergestellt mit 700 μM Phosphatidylserin und 180 μM 1,2-Diolefin in 0,3% Triton X100, 0,2 mM CaCl2, 100 μM ATP, [γ-32P ]-ATP (105 dpm), Chelerythrine Chloride (NSC 646662) (in Dimethylsulfoxid gelöst) und das Enzym (0,5 μg Protein). Nach Inkubation bei 30℃ für 3 Minuten wird die Reaktion durch Zugabe von 3 mL 20%iger Trichloressigsäure beendet. Säurepräzipitierbare Materialien werden auf Whatman GFE-Filtern gesammelt und ausgiebig mit eiskalter 20%iger Trichloressigsäure gewaschen. Die Radioaktivität auf den Filtern wird mit einem Flüssigkeitsszintillationszähler gemessen. Die Proteinkinase C-Aktivität wird für unspezifische Aktivität korrigiert, indem der Assay in Abwesenheit von Mizellen und CaCl2 durchgeführt wird.
In vivo

Chelerythrine Chloride (NSC 646662) (5 mg/kg i.p.) results in tumor growth delay in mice bearing SQ-20B xenografts. This compound (5 mg/kg) treatment significantly increases TUNEL-positive nuclei in the myocardium as well as cleaved forms of caspase-3 and -9 in adult rat.

Referenzen
  • [4] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/11603925/
  • [5] https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/12702731/