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AT7867 Akt Inhibitor

Kat.-Nr.: S1558

AT7867 ist ein potenter ATP-kompetitiver Inhibitor von Akt1/2/3 und p70S6K/PKA mit IC50 von 32 nM/17 nM/47 nM bzw. 85 nM/20 nM in zellfreien Assays; diese Verbindung zeigt geringe Aktivität außerhalb der AGC-Kinase-Familie.
AT7867 Akt Inhibitor Chemical Structure

Chemische Struktur

Molekulargewicht: 337.85

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Qualitätskontrolle (Quality Control)

Charge: Reinheit: 99.97%
99.97

Chemische Informationen, Lagerung & Stabilität (Chemical Information, Storage & Stability)

Molekulargewicht 337.85 Formel

C20H20ClN3

 Lagerung (Ab Erhaltdatum)
CAS-Nr. 857531-00-1 SDF herunterladen Lagerung von Stammlösungen

Synonyme N/A Smiles C1CNCCC1(C2=CC=C(C=C2)C3=CNN=C3)C4=CC=C(C=C4)Cl

Löslichkeit (Solubility)

In vitro
Charge:

DMSO : 68 mg/mL (201.27 mM)
(Feuchtigkeitskontaminiertes DMSO kann die Löslichkeit verringern. Verwenden Sie frisches, wasserfreies DMSO.)

Ethanol : 5 mg/mL

Water : Insoluble

Molaritätsrechner

Masse Konzentration Volumen Molekulargewicht
Verdünnungsrechner Molekulargewicht-Rechner

In vivo
Charge:

In-vivo-Formulierungsrechner (Klare Lösung)

Schritt 1: Geben Sie unten die Informationen ein (Empfohlen: Ein zusätzliches Tier einplanen, um Verluste während des Experiments auszugleichen)

mg/kg g μL

Schritt 2: Geben Sie die In-vivo-Formulierung ein (Dies ist nur der Rechner, nicht die Formulierung. Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn im Abschnitt Löslichkeit keine In-vivo-Formulierung angegeben ist.)

% DMSO % % Tween 80 % ddH2O
%DMSO %

Berechnungsergebnisse:

Arbeitskonzentration: mg/ml;

Methode zur Herstellung der DMSO-Stammflüssigkeit: mg Wirkstoff voraufgelöst in μL DMSO ( Konzentration der Stammflüssigkeit mg/mL, Bitte kontaktieren Sie uns zuerst, wenn die Konzentration die DMSO-Löslichkeit der jeweiligen Wirkstoffcharge überschreitet. )

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammflüssigkeit, fügen Sie als Nächstes hinzuμL PEG300, mischen und aufklären, fügen Sie als Nächstes hinzuμL Tween 80, mischen und aufklären, fügen Sie als Nächstes hinzu μL ddH2O, mischen und aufklären.

Methode zur Herstellung der In-vivo-Formulierung: Nehmen Sie μL DMSO Stammflüssigkeit, fügen Sie als Nächstes hinzu μL Maisöl, mischen und aufklären.

Hinweis: 1. Bitte stellen Sie sicher, dass die Flüssigkeit klar ist, bevor Sie das nächste Lösungsmittel hinzufügen.
2. Achten Sie darauf, die Lösungsmittel in der richtigen Reihenfolge hinzuzufügen. Sie müssen sicherstellen, dass die im vorherigen Schritt erhaltene Lösung klar ist, bevor Sie das nächste Lösungsmittel hinzufügen. Physikalische Methoden wie Vortexen, Ultraschall oder ein warmes Wasserbad können zur Unterstützung des Lösungsvorgangs verwendet werden.

Wirkungsmechanismus (Mechanism of Action)

Targets/IC50/Ki
Akt2
(Cell-free assay)
17 nM
PKA
(Cell-free assay)
20 nM
Akt1
(Cell-free assay)
32 nM
Akt3
(Cell-free assay)
47 nM
p70 S6K
(Cell-free assay)
85 nM
RSK1
(Cell-free assay)
>100 nM
In vitro
AT7867 also inhibits structurally related AGC kinases p70S6K and PKA with IC50 of 20 nM and 85 nM, respectively. This compound shows ATP-competitive activity to Akt2 with Ki of 18 nM. It exhibits antiproliferation in cell lines with PTEN or PIK3CA mutations and shows great potent to MES-SA, MDA-MB-468, MCF-7, HCT116 and HT29 with IC50 of 0.94 μM, 2.26 μM, 1.86 μM, 1.76 μM and 3.04 μM, respectively. This chemical also suppresses the cell growth of U87MG, PC-3 and DU145 cells with IC50 of 8.22 μM, 10.37 μM and 11.86 μM, respectively. It suppresses Akt activity by inhibiting phosphorylation of GSK-3β in human tumor cells with IC50 of 2-4 μM. This compound also induces the phosphorylation of the following Akt direct substrates including proapoptotic transcription factors FKHR (FoxO1a), FKHRL1 (FoxO3a) and the downstream target S6RP in U87MG cells.
Kinase-Assay
In-vitro-Kinase-Assays
Kinase-Assays für Akt2, PKA, p70S6K und CDK2/Cyclin A werden alle in einem radiometrischen Filterbindungsformat durchgeführt. Die Assay-Reaktionen werden in Gegenwart von AT7867 angesetzt. Für Akt2 werden das Akt2-Enzym und 25 μM Aktide-2T-Peptid (HARKRERTYSFGHHA) in 20 mM MOPS (pH 7,2), 25 mM β-Glycerophosphat, 5 mM EDTA, 15 mM MgCl2, 1 mM Natriumorthovanadat, 1 mM DTT, 10 μg/mL Rinderserumalbumin und 30 μM ATP (1,16 Ci/mmol) 4 Stunden lang inkubiert. Für PKA werden das PKA-Enzym und 50 μM Peptid (GRTGRRNSI) in 2 mM MOPS (pH 7,2), 25 mM β-Glycerophosphat, 5 mM EDTA, 15 mM MgCl2, 1 mM Orthovanadat, 1 mM DTT und 40 μM ATP (0,88 Ci/mmol) 20 Minuten lang inkubiert. Für p70S6K werden das p70S6K-Enzym und 25 μM Peptidsubstrat (AKRRRLSSLRA) in 10 mM MOPS (pH 7), 0,2 mM EDTA, 1 mM MgCl2, 0,01% β-Mercaptoethanol, 0,1 mg/mL Rinderserumalbumin, 0,001% Brij-35, 0,5% Glycerin und 15 μM ATP (2,3 Ci/mmol) 60 Minuten lang inkubiert. Für CDK2 werden das CDK2/Cyclin A-Enzym und 0,12 μg/mL Histon H1 in 20 mM MOPS (pH 7,2), 25 mM β-Glycerophosphat, 5 mM EDTA, 15 mM MgCl2, 1 mM Natriumorthovanadat, 1 mM DTT, 0,1 mg/mL Rinderserumalbumin und 45 μM ATP (0,78 Ci/mmol) 4 Stunden lang inkubiert. Die Assay-Reaktionen werden durch Zugabe eines Überschusses an Orthophosphorsäure gestoppt, und die gestoppte Reaktionsmischung wird dann auf Millipore MAPH-Filterplatten übertragen und filtriert. Die Platten werden dann gewaschen, Szintillationsmittel wird hinzugefügt, und die Radioaktivität wird durch Szintillationszählung auf einem Packard TopCount gemessen. Die IC50-Werte werden aus Replikationskurven mit der GraphPad Prism-Software berechnet. Akt1- und Akt3-Enzymassays werden durchgeführt.
In vivo
AT7867 shows bioavailability of 44% in mice by p.o. route. This compound could increase the cleaved PARP in MES-SA xenografts at 20 mg/kg i.p. or 90 mg/kg p.o.. It significantly inhibits the tumor growth in MES-SA xenografts or U87MG xenografts with T/C of 0.37 and 0.51, respectively.
Referenzen